Анализът на разклонена ДНК (bDNA) осигурява уникален и мощен инструмент за надеждно количествено определяне на молекулите на нуклеинова киселина. Фундаментално различен от методите за целева амплификация като PCR, bDNA анализът измерва директно молекулите на нуклеинова киселина на физиологични нива чрез усилване на репортерния сигнал, вместо да репликира целевите последователности като средство за откриване, и по този начин избягва грешките, присъщи на екстракцията и амплификацията на целевите последователности.
bDNA анализът използва линейно усилване на сигнала с помощта на синтетични олигонуклеотидни сонди и bDNA молекули и може да измерва точно и прецизно между приблизително 500 и 10 000 000 молекули. Новите разработки в bDNA технологията включват добавянето на предусилващи молекули и включването на нови нуклеотиди, isoC и isoG, в последователностите на сондата на олигонуклеотиди за допълнително подобряване на сигнала и намаляване на шума, причинен от неспецифична хибридизация на компонентите на bDNA анализа. Тези подобрения разшириха границата на количествено откриване на bDNA анализа до 50 молекули.
Много подходящ за рутинна употреба в клинична или изследователска среда, bDNA анализът е успешно приложен в редица области, включително прогнозиране и наблюдение на пациенти с вирусни заболявания. Осигурявайки надеждно средство за директно количествено определяне на вирусния товар в клинични проби, bDNA анализите са разработени за измерване на ДНК на вируса на хепатит В, РНК на вируса на хепатит С, РНК на човешкия имунодефицитен вирус тип 1 и ДНК на цитомегаловируса.
С персонализирания дизайн на олигонуклеотидни сонди, потенциалните приложения на bDNA анализа отиват далеч отвъд количественото определяне на вирусни нуклеинови киселини. Чрез създаване на олигонуклеотидни сонди за специфични последователности на целеви молекули нуклеинова киселина, bDNA анализът е адаптиран към голямо разнообразие от приложения.
Например, изследователите са проектирали сонди за bDNA анализ за измерване на нивата на клетъчната иРНК. Това се оказа плодотворен подход за редица изследователски приложения, включително проследяване на промените в нивата на иРНК на цитокини в популации от здрави и имунокомпрометирани пациенти, изследване на модели на сплайсинг на инсулин и оценка на индукцията на стрес ген за приложения в молекулярната токсикология.
Като се има предвид неговата гъвкавост, лекота на използване и висока производителност, bDNA анализът бързо се превръща в метод на избор за количествено определяне на нуклеинова киселина.
БДНК анализът използва формат на микроплака с 96 гнезда и се основава на серия от специфични хибридизационни реакции и хемилуминесцентно откриване на хибридизираните сонди. На повърхността на всяка микроямка има “захващащи” сонди, съдържащи специфична нуклеотидна последователност.
Тези улавящи сонди се свързват с подгрупа от “целеви сонди“, които се свързват със специфични нуклеотидни последователности на целевата молекула нуклеинова киселина. Тази серия от хибридизации закотвя целевата молекула нуклеинова киселина към повърхността на микроямката. Откриването на целевата нуклеинова киселина и усилването на сигнала се извършва чрез друга серия от хибридизации.
Втора подгрупа от целеви сонди свързва целевата молекула нуклеинова киселина с усилващи bDNA молекули. С добавянето на предварително усилващи молекули за осигуряване на допълнителен слой на усилване между целевите сонди и усилващите молекули на разклонената ДНК технология (bDNA) може да се постигне още по-голямо усилване на сигнала. Всяка bDNA усилваща молекула е проектирана да съдържа 15 рамена, всяко от които съдържа три места за свързване за алкална фосфатаза-конюгирани “маркиращи сонди”.
Хемилуминесцентен сигнал се генерира при въвеждане на диоксетанов субстрат, който се активира от алкална фосфатаза. Този сигнал лесно се определя количествено чрез преброяване на броя на фотоните, излъчени в луминометър. Анализът на технологията на разклонената ДНК (bDNA) е присъщо количествен, тъй като броят на излъчените фотони е пряко свързан с количеството целева нуклеинова киселина в пробата.
SOCS1 е член на семейството на STAT инхибитори (SSI), известни също като супресори на цитокиново сигнализиране (SOCS). Членовете на семейството на SSI са отрицателни регулатори на цитокиновото сигнализиране. SOCS1 функционира надолу по веригата на цитокиновите рецептори и участва в отрицателна обратна връзка за отслабване на цитокиновото сигнализиране.
Поликлоналните антитела се произвеждат чрез имунизиране на животни със синтетичен пептид, съответстващ на остатъците около Ala156 на човешки SOCS1. Антителата се пречистват чрез протеин А и пептидна афинитетна хроматография.
Антителата, откриващи ASCT2 “SLC1A5 антитяло”, могат да се използват в редица научни приложения, включително Western Blot, имунохистохимия (вграден в парафин), имунопреципитация, имуноцитохимия и поточна цитометрия. „Антителото SLC1A5“ е насочено към ASCT2 в проби от хора, плъхове и мишки. Нашите поликлонални антитела срещу ASCT2 са разработени при зайци. Тези антитела са проверени чрез относителна експресия, за да се потвърди тяхната специфичност срещу ASCT2. Антителата SLC1A5 ви помагат да намерите антитялото ASCT2, което отговаря на вашите нужди.
Муцин 2 антитяло са антитела, които откриват MUC2, могат да се използват в различни научни приложения, включително имунохистохимия (парафин), имуноцитохимия, поточна цитометрия, имунохистохимия и Western Blot. „Муцин 2 антителата са насочени към MUC2 в проби от хора, мишки и плъхове. Нашите поликлонални, рекомбинантни моноклонални и моноклонални антитела срещу MUC2 са разработени в заек и мишка. Намерете MUC2 антитялото, което отговаря на вашите нужди.
Муцин 2/MUC2 антитяло (Ccp58) е антитяло срещу моноклонално антитяло миши IgG
Муцин 2/MUC2 антитяло (Ccp58) се препоръчва за откриване на Mucin2 от миши, плъхове и човешки произход чрез IF и IHC(P).
Прочетете много повече в нашия блог
